Različiti protokoli skladištenja i zamrzavanja ekstracelularnih vezikula: sistematski pregled.
Stem cell research & therapy
Sažetak istraživanja
Pozadina Ekstracelularni vezikuli (EV) se smatraju obećavajućim alatima u regenerativnoj medicini. Međutim, nanoska svojstva električnih vozila čine ih osjetljivim na uvjete okoline. Optimalni protokoli za skladištenje su ključni za održavanje strukturnog, molekularnog i funkcionalnog integriteta EV. Ovaj sistematski pregled imao je za cilj prikupljanje dokaza o efektima različitih protokola za skladištenje na karakteristike i integritet EV. Strategija Sprovedena je sveobuhvatna potraga za originalnim studijama koje su istraživale uticaje temperature skladištenja, tehnika zamrzavanja, ciklusa zamrzavanja-odmrzavanja i stabilizacijskih strategija na koncentraciju EV, distribuciju veličine, morfologiju, sadržaj tereta i bioaktivnost. Analizirani su rezultati iz 50 uključenih studija.
Rezultati Podaci su pokazali da su brze procedure zamrzavanja i konstantne temperature ispod nule (optimalno - 80 °C) rezultirale odgovarajućom količinom EV i očuvanjem tereta. Podvrgavanje EV-a višestrukim ciklusima zamrzavanja-odmrzavanja smanjilo je koncentraciju čestica, sadržaj RNK, narušenu bioaktivnost i povećanu veličinu i agregaciju EV-a. Elektronska mikroskopija otkrila je povećanje vezikula i fuziju, zajedno s deformacijom membrane nakon izlaganja podstandardnim protokolima skladištenja. Dodavanje stabilizatora poput trehaloze pomoglo je električnim vozilima da održe integritet. Treba napomenuti da skladištenje u prirodnim biofluidima nudi poboljšanu stabilnost u odnosu na pročišćena EV u puferima.
Zaključak Podaci naglašavaju kritičnu potrebu za preciznim protokolima skladištenja za EV kako bi se osigurali ponovljivi rezultati istraživanja i kliničke primjene. Potrebne su daljnje studije korištenjem pouzdanih metoda kako bi se stvorile specifične smjernice za poboljšanje stabilnosti električnih vozila u različitim aplikacijama.
Prikaži originalni naslov i sažetak na engleskom
Different storage and freezing protocols for extracellular vesicles: a systematic review.
Background Extracellular vesicles (EVs) have been considered promising tools in regenerative medicine. However, the nanoscale properties of EVs make them sensitive to environmental conditions. Optimal storage protocols are crucial for maintaining EV structural, molecular, and functional integrity. This systematic review aimed to gather evidence on the effects of various storage protocols on EV characteristics and integrity. Strategy A comprehensive search was conducted for original studies investigating the impacts of storage temperature, freezing techniques, freeze-thaw cycles, and stabilizing strategies on EV concentration, size distribution, morphology, cargo content, and bioactivity.
Results from 50 included studies were analyzed.
Results Data indicated that rapid freezing procedures and constant subzero temperatures (optimally - 80 °C) resulted in appropriate EV quantity and cargo preservation. Subjecting EVs to multiple freeze-thaw cycles decreased particle concentrations, RNA content, impaired bioactivity, and increased EV size and aggregation. Electron microscopy revealed vesicle enlargement, and fusion, along with membrane deformation after being exposed to substandard storage protocols. The addition of stabilizers like trehalose helped EVs to maintain integrity. Of note, storage in native biofluids offered improved stability over purified EVs in buffers.
Conclusion Data emphasize the critical need for precise storage protocols for EVs to ensure reproducible research outcomes and clinical applications. Further studies using reliable methods are necessary to create specific guidelines for improving the stability of EVs in various applications.
Izvorni podaci
- DOI
- 10.1186/s13287-024-04005-7
- PMID
- 39593194
- PMCID
- PMC11600612
- Provjereno
- 2026-07-26
Naslov i sažetak prevedeni su automatski i prijevod može sadržavati netačnosti ili neprecizne stručne izraze. Za sve detalje, citiranje i medicinsko tumačenje pregledajte originalnu englesku verziju članka. Ne donosite zdravstvene odluke samo na osnovu ovog prijevoda.
Pregledaj originalni članak na engleskom